猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 信爱国 宋建领 李华春 高华峰
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 荧光定量RT-PCR RNA标准品 北美型毒株 欧洲型毒株
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 497-500
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）北美型毒株和欧洲型毒株N蛋白基因保守序列,设计1对特异性引物和1条探针,以ABI公司PRRSV RNA为标准品,优化了PRRSV实时荧光定量RT-PCR检测方法,25μL反应体系引物prrsv-f/prrsv-r（20μmol/L）各0.5μL,探针prrsv-p（10μmol/L）0.5μL为反应最佳工作浓度,标准曲线Ct值和模板启始浓度的log值之间具有良好的线性相关性。特异性、敏感性和重复性检测结果显示,该方法能特异的检测PRRSV北美型毒株和欧洲型毒株,与其他主要猪病病原检测无交叉反应;针对PRRSV RNA标准品检测,灵敏度可以达到10拷贝;重复性检测Ct值变异系数为0.74%～1.52%。用建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法,对40份临床样品检测,与商品化试剂盒检测结果完全一致。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋建领		27	214	9.0	13.0
2	李华春		11	34	4.0	5.0
3	高华峰		14	73	6.0	8.0
4	信爱国		10	93	5.0	9.0