噻虫嗪单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法的建立

• 作者: 李广领 李金丽 王自良 肖娜娜 赵亚娟 陈锡岭
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 噻虫嗪 半抗原 单克隆抗体 残留 酶联免疫吸附法
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1098-1103
• 分类号: O65
• 字数: 5031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1096.2012.11245

摘要

通过化学修饰合成了噻虫嗪人工半抗原,采用碳二亚胺法将该半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,成功制备了分子结合比合理的免疫原和包被原.经过免疫原免疫6周龄Balb/c小鼠、PEG介导免疫鼠脾细胞和骨髓瘤细胞的融合和阳性杂交瘤细胞的筛选和克隆化,获得了效价高达1∶6.4×105的抗噻虫嗪单克隆抗体,抗体亚类为IgG1型.优化了ELISA实验条件,建立了基于单克隆抗体技术的噻虫嗪残留间接竞争ELISA方法.本方法的抑制中浓度(IC30)为0.0255 mg/L,检测灵敏度(IC20)为0.0022 mg/L,检出限(IC10)为0.001 mg/L.除噻虫胺外,该抗体与其它噻虫嗪结构类似物无交叉反应.以自来水为基质的噻虫嗪添加回收实验显示,0.01,0.5和10.0 mg/L添加水平的回收率均大于75％,且各添加水平重复测定8次的相对标准偏差均小于8％,说明所建立的间接竞争ELISA准确度高,重复性好,适合水中噻虫嗪残留的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王自良		141	803	15.0	20.0
2	李广领		91	631	14.0	20.0
3	陈锡岭		105	547	13.0	17.0
4	李金丽		5	6	2.0	2.0
5	肖娜娜		4	6	2.0	2.0
6	赵亚娟		3	5	2.0	2.0