人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒的构建及活性检测

• 作者: 岳斌 张国庆 江峰 胡有谷 陈伯华 马学晓
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β3 结缔组织生长因子 基质金属蛋白酶抑制剂1 慢病毒 293细胞 基因治疗
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 699-703
• 分类号: R318
• 字数: 4808字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.04.030

摘要

背景:前期试验显示单个病毒载体介导的多基因共表达系统能够显著提高椎间盘退变转基因疗效.目的:构建人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒.方法:应用全基因合成技术,以"自剪切多肽2A"串联目的基因,并克隆到慢病毒表达质粒构建重组慢病毒质粒Lenti-TGF-β3-P2A-CTGF-T2A-TIMP1.转染293细胞后,应用RT-PCR和Western-Blot技术分别检测转染后不同时间点目的基因mRNA和蛋白质表达水平.结果与结论:RT-PCR和Western-blot技术检测结果显示重组质粒成功表达了3种目的基因,并于转染后48 h左右达到峰值,"2A"结构下游基因蛋白质表达量约为上游基因的80%.说明成功构建了携带人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因的慢病毒多表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张国庆	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	45	194	8.0	12.0
2	马学晓	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	50	100	6.0	7.0
3	胡有谷	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	120	1086	17.0	28.0
4	陈伯华	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	111	468	10.0	18.0
5	江峰	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	15	148	6.0	12.0
6	岳斌	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	26	54	5.0	6.0