小麦内生固氮菌分离及其ACC脱氨酶测定

• 作者: 周义清 孙建光 徐晶 秦宝军 罗琼 胡海燕 高淼
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 内生固氮菌 ACC脱氨酶 根际促生细菌
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 耕作栽培·生理生化·农业信息技术
• 页码范围: 1066-1073
• 分类号: S512.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.06.004

摘要

[目的]了解小麦内生固氮菌数量,筛选具有ACC(1-aminocyclopropane-1-carboxylate,1-氨基环丙烷-1-羧酸)脱氨酶活性的小麦内生固氮菌,确定筛选菌株的系统发育地位与分类地位,为微生物肥料生产收集菌种资源.[方法]样品表面灭菌后采用无氮培养法筛选内生固氮菌,乙炔还原法测定菌株固氮酶活性；采用ACC唯一氮源法筛选ACC脱氨酶阳性菌,比色法定量测定ACC脱氨酶活性；PCR扩增得到菌株16S rDNA,通过序列测定和相似性分析研究菌株的系统发育;通过形态、生理生化特征和16S rDNA序列比对鉴定菌种.[结果]小麦体内固氮菌数量为(0.2-17.8)× 105 cfu·g-1鲜重；分离到小麦内生固氮菌60株,固氮酶活性在1- 36 nmol C2H4/h·mg 蛋白,其中9株具有ACC脱氨酶活性,活性在0.87-9.32μmolα-丁酮酸/h·mg蛋白；新分离菌株9136固氮酶活性为1.82 nmol G2H4/h·mg蛋白,ACC脱氨酶活性为9.32μmol α-丁酮酸/h·mg蛋白,初步鉴定为假单胞菌Pseudomonas sp..[结论]田间自然生长的小麦体内有大量固氮菌,数量在105cfu·g-1鲜重,其中部分菌株具有ACC脱氨酶活性,个别菌株具有较高的ACC脱氨酶活性,可能对作物抵御不良环境具有作用.