EMAP-Ⅱ对紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1相互作用的调节和机制

• 作者: 刘丽波 刘云会 王佐周 薛一雪
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ occludin ZO-1 蛋白激酶C 血肿瘤屏障
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 481-484,493
• 分类号: R341.6
• 字数: 3920字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2012.06.001

摘要

目的 研究内皮一单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAP-Ⅱ)对血肿瘤屏障(BTB)紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1分布和相互作用的影响,以及蛋白激酶C(PKC)活性的变化,探讨PKC在EMAP-Ⅱ开放紧密连接中的作用.方法 提取和培养大鼠脑微血管内皮细胞,建立体外BTB模型;实验分为7组,即模型组、EMAP-Ⅱ0.5 h组、EMAP-Ⅱ1h组、EMAP-Ⅱ2h组、EMAP-Ⅱ3h组、EMAP-Ⅱ6h组和EMAP-Ⅱ12h组.应用Milicell-ERS系统检测体外BTB模型跨内皮细胞阻抗值的变化;双重免疫荧光检测内皮细胞中紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的分布和定位;免疫共沉淀检测内皮细胞中occludin和ZO-1的结合水平;PKC活性检测试剂盒检测体外BTB模型内皮细胞中总PKC的活性.结果 与模型组相比,EMAP-Ⅱ显著降低了体外BTB模型的踌内皮细胞阻抗值,增加了BTB通透性;在模型组,紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1在内皮细胞边缘呈连续分布,并且二者存在共定位,EMAP-Ⅱ能够使occludin和ZO-1在内皮细胞边缘的分布减少,二者的共定位减弱;免疫共沉淀结果也显示EMAP-Ⅱ能够减弱occludin和ZO-1的结合;上述作用在EMAP-Ⅱ作用1h时效果最显著(P＜0.01);同时发现EMAP-Ⅱ作用后,BTB模型内皮细胞中PKC的活性显著升高,在EMAP-Ⅱ作用1h时达峰值(P＜0.01).结论 EMAP-Ⅱ能够调节紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1在内皮细胞的相互作用,开放紧密连接;PKC可能是EMAP-Ⅱ影响occludin和ZO-1相互作用、调节紧密连接的机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘云会	中国医科大学附属盛京医院神经外科	200	742	13.0	18.0
2	王佐周	中国医科大学基础医学院病理学教研室	17	42	5.0	5.0
3	刘丽波	中国医科大学基础医学院神经生物学教研室	45	181	8.0	11.0
4	薛一雪	中国医科大学基础医学院神经生物学教研室	121	520	10.0	15.0