实时定量PCR技术检测结核分枝杆菌蛋白编码基因表达水平研究

• 作者: 刘艳 刘金菊 杨紧根 王远志 袁俐 陈伟
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Ag85B结核分枝杆菌蛋白 38ku结核分枝杆菌蛋白 MPT64结核分枝杆菌蛋白 实时定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 254-257
• 页数: 4页
• 分类号: R378.911
• 语种: 中文

摘要

[目的]运用实时定量PCR(qRT-PCR)检测66株结核分枝杆菌蛋白编码基因(fbpB,psts1,mpt64)的表达水平,探讨结核分枝杆菌耐药菌株与敏感菌株,北京基因型菌株与非北京基因型菌株的蛋白抗原在转录水平的差异.[方法]根据GenBank提供的序列,设计特异性引物,扩增目的基因片段,克隆人载体,重组质粒经纯化及梯度稀释,应用qRTPCR检测基因的表达水平.[结果]北京基因型菌株psts1基因表达水平与非北京基因型菌株比较差异有统计学意义(t=3.721,P＜0.01)；耐药菌株mpt64基因表达水平与敏感菌株比较差异有统计学意义(t=3.951,P＜0.01).结核分枝杆菌活菌的扩增曲线呈典型的S型,结核分枝杆菌死菌和非结核分枝杆菌呈水平直线,未检测到荧光信号.[结论]北京基因型结核分枝杆菌psts1基因的表达量低于非北京基因型,结核分枝杆菌耐药菌株mpt64基因的表达量低于敏感株.