一种基于HRM技术的快速DNA甲基化检测方法

• 作者: 毛雄英 王卫华 胡笑蓉 陈辉
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲基化 纯化 甲基化特异性高分辨率熔解曲线
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 临床检验
• 页码范围: 1336-1338
• 页数: 3页
• 分类号: R730.4
• 语种: 中文

摘要

目的:建立经济可靠的基于MS-HRM技术的检测DNA甲基化的方法.方法:采用简单的沉淀法纯化回收Bis-DNA(重亚硫酸钠处理后的DNA),首次采用picogreen为MS-HRM分析染料,并用新建立的方法检测结直肠癌患者组织SEPT9启动子甲基化水平.结果:新方法的回收率在63％以上,纯度、得率都显著优于经典方法中的Promega Wizard DNA Clean-up System,Picogreen染料可检测到低至0.5％甲基化.共检测34例结直肠癌组织,其中SEPT9异常甲基化的组织33例,占97％,检出率高于文献报导.结论:本文建立的方法简单快速、灵敏度高、重复性好、经济、可操作性强的优点.