禽流感病毒RT-PCR ELISA诊断方法的建立

• 作者: 张琳 张秀美 杨少华 胡北侠 许传田 颜士敢 黄艳艳
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 RT-PCR ELISA 诊断
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医-研究报告
• 页码范围: 48-52
• 分类号: S83
• 字数: 3597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2012.02.012

摘要

针对A型禽流感(AI)保守的M基因设计引物,并分别用地高辛和生物素标记,建立检测A型AIV的RT-PCR ELISA方法.试验主要对RT-PCR ELISA的各种反应条件进行了优化,确定了2mg/mL的链霉亲和素包被、1:3000抗地高辛的过氧化物酶及孵育时间等最适反应条件.该方法的敏感性比常规琼脂糖凝胶电泳检测方法高100倍以上,而且特异性强,克服了组织样品中AIV含量少而难以检测的困难,为禽流感的早期诊断和分子流行病学调查提供了一条新途径.