抗猪繁殖与呼吸综合征病毒转基因细胞系的建立

• 作者: 剧世强 罗碧平 芮荣 马汝钧
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 PK-15细胞 转基因细胞系
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 8-11
• 分类号: S858.28
• 字数: 3290字
• 语种: 中文

摘要

采用脂质体法将具有抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的shRNA质粒pEGFP-N1-shRNA导入PK-15细胞中,经G418药物筛选后,分离扩增绿色荧光蛋白阳性细胞,获得抗PRRSV转基因PK细胞系.通过对转染方法和条件的优化,确立最佳的转染及筛选步骤；对得到的阳性转基因细胞进行冷冻-解冻,并作PCR检测.结果表明,G418最佳筛选浓度为600 μg/mL,脂质体与质粒的最佳转染比例为7∶2,最佳转染时间为24h.本研究成功建立抗PRRSV转基因细胞系,为进一步的功能验证及体细胞核移植奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	芮荣	南京农业大学动物医学院	81	369	9.0	15.0
2	剧世强	南京农业大学动物医学院	25	55	3.0	6.0
3	马汝钧	南京农业大学动物医学院	2	3	1.0	1.0
4	罗碧平	南京农业大学动物医学院	2	3	1.0	1.0