毛尖紫萼藓GH394基因克隆、表达载体的构建

• 作者: 宋璐 张百成 沙伟
• 来源期刊: 北方园艺
• 学科: 生物学
• 关键词: 毛尖紫萼藓 抗旱 T-PCR 基因克隆 载体构建
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 113-116
• 分类号: Q348
• 字数: 3603字
• 语种: 中文

摘要

利用PCR技术,以毛尖紫萼藓总RNA为模板,扩增出上、下游分别加入BamHⅠ、SacⅠ酶切位点的GH394(657 bp)基因CDS区全长序列,采用pMD18-T Vector、pRI 101-AN Vector 构建了该基因克隆、表达载体,并将重组载体质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)DH 5α和根癌农杆菌(Agrobacterium tume faciens)工程菌株GV3101中,并选用X-gal、IPTG和利福平(Rifampicin,Rif)、卡那霉素(Kanamyein,Km)筛选阳性菌株.结果表明:已成功构建pMD-GH394克隆载体和pRI 101-AN-GH394表达载体并将重组质粒转入目的菌株中；该试验为后续实现毛尖紫萼藓GH394基因抗旱预期功能的验证,奠定了良好的试验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沙伟	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	160	1730	21.0	34.0
2	宋璐	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	8	24	3.0	4.0
3	张百成	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	1	1	1.0	1.0