Pax5基因在野生型斑马鱼全胚胎发育早期的表达

• 作者: 何志旭 姚冬静 李涛 舒莉萍 马建娟 黄惠敏
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 斑马鱼 pCS2+载体 pax5基因 反义mRNA 原位杂交
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-25
• 分类号: Q132.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1008.2012.00021

摘要

目的 为了深入了解在胚胎发育过程中,尤其是在早期B淋巴细胞的生成和中脑的发育过程中pax5基因可能的作用及其机制,选择斑马鱼作为实验动物,构建野生型斑马鱼pCS2+ -pax5重组质粒,并观察pax5基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达.方法 提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼pax5基因片段,将得到的pax5基因片段和pCS2+质粒经EcoR Ⅰ、XbaⅠ双酶切后,在T4DNA连接酶的作用下插入pCS2+质粒中,通过对重组质粒进行双酶切、菌落PCR以及插入片段序列测定鉴定后,经T3 RNA体外转录体系合成地高辛标记的pax5基因的反义mRNA探针.将得到的探针用全胚胎原位杂交技术检测pax5基因在斑马鱼早期发育过程中的表达.结果 成功构建pCS2+ -pax5重组质粒并制备了pax5基因的反义mRNA探针,通过斑马鱼原位杂交技术,发现在斑马鱼受精后18～72小时(18～72 hpf)胚胎头部的小脑、中脑后脑交界处均可观察到pax5基因阳性杂交信号；在24～72 hpf胚胎的耳蜗均可观察到pax5基因的阳性杂交信号,且随着时相的增长其表达逐渐增多；在18～48 hpf胚胎的脊索部位可见pax5基因的阳性杂交信号.结论 明确了pax5基因在斑马鱼胚胎的脑部、脊索神经系统高表达,并首次证实其在耳蜗听神经的早期发育过程中有表达,可能对斑马鱼早期胚胎神经系统的发育起着某些至关重要的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	舒莉萍	贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心	37	117	6.0	8.0
5	何志旭	贵阳医学院儿科教研室	73	246	8.0	12.0
9	李涛	贵阳医学院儿科教研室	9	73	3.0	8.0
10	姚冬静	贵阳医学院儿科教研室	3	6	2.0	2.0
11	马建娟	贵阳医学院儿科教研室	1	2	1.0	1.0
12	黄惠敏	贵阳医学院儿科教研室	1	2	1.0	1.0