棉花GhDHAR2基因克隆、功能序列分析及原核表达

• 作者: 李鸿彬 田大鹏 石峰 葛娟
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 脱氢抗坏血酸还原酶基因克隆 原核表达 DHAR酶活力
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 65-69
• 分类号: S562
• 字数: 3868字
• 语种: 中文

摘要

通过RT-PCR方法从棉花纤维组织中克隆得到脱氢抗坏血酸还原酶基因GhDHAR2的cDNA,该基因开放阅读框为639 bp,编码212个氨基酸的蛋白质.同源性序列对比分析显示,GhDHAR2蛋白具有较高的保守性,具有典型的功能结构域,包括GST-N家族和GST-C-DHAR家族的功能结构域；进化树分析显示GhDHAR2和拟南芥AtDHAR2在进化关系上较近.将GhDHAR2基因连接到原核表达载体pET-28a中,将重组载体pET28a-GhDHAR2转入到表达菌株BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达出重组GhDHAR2蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳分析显示重组蛋白大小约为28 kD,诱导表达的重组蛋白具有较高的DHAR活性.首次克隆了棉花GhDHAR2基因,通过结构域分析其可能的作用,并成功进行蛋白体外表达及酶活性分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田大鹏	石河子大学生命科学学院	1	11	1.0	1.0
2	葛娟	石河子大学生命科学学院	14	74	6.0	8.0
3	石峰	石河子大学生命科学学院	18	57	4.0	7.0