百合抗镰刀菌资源鉴定及抗病相关基因筛选

• 作者: 丁鲲 吴丽芳 崔光芬 张艺萍 段青 王祥宁 王继华 贾文杰 马璐琳
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 百合大花卷丹 百合尖孢镰刀菌 SSH文库 基因表达分析
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 观赏植物
• 页码范围: 1141-1150
• 分类号: S682.2
• 语种: 中文

摘要

对20个百合种质资源的组培苗进行尖孢镰刀菌百合专化型（Fusariumoxysporumfsp．1ilii）室内接种鉴定；以筛选出有较好抗性的大花卷丹（Liliumleichtliniiv轧maximowivziiBaker）为材料，以镰刀菌诱导12和24h的作为处理组，无菌水处理作为对照组，采用SMART技术构建了百合经镰刀菌诱导后的抑制差减正、反向两个SSH文库。在正向文库中选择了4个抗病相关的ESTs，用半定量RT-PCR分析这些ESTs的表达情况。经接种鉴定，20个百合种质资源中，对百合镰刀菌表现高抗的有3个，中抗9个，感病8个；SSH文库ESTs片段大小为200-2000bp。依据斑点杂交结果，从正向SSH文库中挑取50个单克隆进行测序和比对分析，得到6种共10条抗病相关EST。通过半定量RT-PCR对其中的4条抗病相关ESTs：丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（serine／threonineproteinkinase，SffPK）、谷胱甘肽S一转移酶（glutathioneS．transferase，GST）、过氧化物酶（peroxidase，POD）和亲环素（cyclophilin，CYP）的表达情况进行了分析，证明它们在一定程度上都受百合镰刀菌诱导而表现上调表达，推测其可能参与了百合对镰刀菌枯萎病的抗病过程。