程序性细胞死亡因子5夹心ELISA检测方法的建立及初步应用

• 作者: 刘旺根 孙新城 李恒思 李玉林 王云龙 王国强 王继创 程蕾 董彩文 赵素华 陈英玉
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 程序性细胞死亡因子5 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 癌症 免疫缺陷病
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 22-25
• 分类号: S852.33
• 字数: 3458字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.04.005

摘要

建立一种快速检测人血清中程序性细胞死亡因子5(PDCD 5)的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,初步研究PDCD5蛋白在血清中含量变化与疾病的相关性.用抗PDCD 5多克隆抗体包被酶标板,高碘酸钠法标记PDCD 5单克隆抗体作为酶标抗体,以PDCD 5重组蛋白为标准蛋白绘制标准曲线,以特异性、稳定性和灵敏度对ELISA方法进行评价.检测81份癌症患者及21份类风湿性关节炎患者血清,探讨血清PDCD 5蛋白与癌症、免疫缺陷病的相关性.经双扩散试验检测标记后的抗体和酶都具有生物学活性,初步建立了检测人血清PDCD 5蛋白的定量ELISA方法,该方法具有良好的特异性、稳定性,灵敏度达0.5ng/mL.临床检测应用表明,类风湿性关节炎患者血清PDCD 5含量明显高于正常人血清,癌症患者血清PDCD 5蛋白水平明显低于正常人含量(P＜0.05),各种癌症患者之间PDCD 5含量差异不显著(P＞0.05).成功建立了一种检测人血清PDCD5的定量ELISA方法,为疾病的诊断提供临床参考.