应用酵母双杂交技术筛选与RANK蛋白新基序IVVY相互作用的蛋白

• 作者: 毛平 王顺清 许艳丽 邓晖 钟雯婷
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 酵母双杂交 RANKL/RANK系统 IVVY基序 相互作用蛋白质
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 730-732,737
• 分类号: R733.3
• 字数: 3260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.04.027

摘要

目的:应用酵母双杂交技术筛选小鼠巨噬细胞中与核因子κB受体激活因子(RANK)蛋白上新基序IVVY相互作用的蛋白,以探寻RANKL/RANK系统中介导破骨细胞形成的RANK下游新信号转导蛋白.方法:应用GAL4酵母双杂交系统3,构建仅包含编码新基序535IVVY538 的一小段RANK的cDNA片段为诱饵质粒pGBKT7-IVVY,并与巨噬细胞cDNA文库质粒pGADT7-library共转化AH109酵母,筛选与RANK蛋白新基序IVVY相互作用的蛋白,通过回复性杂交实验验证其可靠性,并对阳性克隆进行测序和基因同源性分析.结果:筛选出4个可能与IVVY基序有相互作用的蛋白,包括Ring1和YY1结合蛋白(RYBP)、ATP结合盒、E2F转录因子和热休克蛋白8,其中表达RYBP的阳性克隆出现频率高、速度快.结论:应用酵母双杂交技术成功地筛选出4个可能与IVVY基序相互作用的候选蛋白,其中RYBP可能性最大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛平	广州医学院附属市一人民医院血液科	51	163	7.0	10.0
2	许艳丽	广州医学院附属市一人民医院血液科	27	93	5.0	8.0
3	钟雯婷	广州医学院附属市一人民医院血液科	3	22	3.0	3.0
4	王顺清	广州医学院附属市一人民医院血液科	19	49	4.0	6.0
5	邓晖	广州医学院附属市一人民医院输血科	5	22	4.0	4.0