二价核酶基因构建及对PLRV负链靶序列的体外切割研究

• 作者: 于嘉林 张剑峰 张鹤龄 杨静华 贺秀芳 迟胜起 郝文胜
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 二价核酶 马铃薯卷叶病毒 复制酶基因 体外切割
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 页码范围: 12-18
• 分类号: Q78
• 字数: 5839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.02.003

摘要

根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)中国分离株(PLRV-Ch)复制酶基因负链RNA的二价核酶序列.将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR；同时将包含核酶切割识别位点的PLRV-Ch复制酶基因cDNA近5’端的874 bp片段反向插入到pGEM-4Z中,构建了体外转录载体pGEM-4ZR5.以线性化的重组质粒pGEM-4ZDR和pGEM-4ZR5为模板,在T7 RNA聚合酶的作用下,分别转录获得核酶RNA和PLRV-Ch复制酶基因5′端负链RNA底物片段.将以上2种RNA转录物混合并经37℃保温后,检测结果表明,所得核酶RNA对PLRV-Ch复制酶基因负链RNA在体外具有较强的特异切割活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于嘉林	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	45	561	14.0	22.0
2	张鹤龄	内蒙古大学生命科学院	30	270	10.0	16.0
3	张剑峰	青岛农业大学农学与植保学院	11	28	3.0	4.0
4	杨静华	内蒙古大学生命科学院	3	29	1.0	3.0
5	迟胜起	青岛农业大学农学与植保学院	24	113	5.0	9.0
6	郝文胜	内蒙古大学生命科学院	3	0	0.0	0.0
7	贺秀芳	青岛农业大学农学与植保学院	1	0	0.0	0.0