兔出血症病毒和巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 刘梅 吴健敏 白安斌 陈凤莲 黄红梅
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 巴氏杆菌 双重PCR
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 21-25
• 分类号: S855.1
• 字数: 3762字
• 语种: 中文

摘要

参照GenBank公布的免出血症病毒(RHDV) VP60、巴氏杆菌kmt基因序列,设计两对引物,分别用于扩增RHDV的VP60和巴氏杆菌kmt基因的目的片段.通过正交试验,对反应各组分浓度与组合、反应退火温度及反应参数进行优化,最后建立了RHDV、巴氏杆菌双重PCR检测方法并进行临床应用.结果显示:本试验建立的双重PCR检测方法能够特异性地检测RHDV及巴氏杆菌,最低核酸检出限分别达到70 pg和62pg.检测免源大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌,结果均为阴性.用本方法对临床送检的104份病料进行检测,结果检出RHDV与巴氏杆菌混合感染1份,巴氏杆菌单独感染10份,双重PCR检测结果与临床病原分离结果完全一致.表明本试验建立的兔出血症病毒和巴氏杆菌双重PCR检测方法具有良好的临床应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄红梅	广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室	35	172	6.0	11.0
2	白安斌	广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室	42	319	11.0	15.0
3	吴健敏	广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室	50	306	10.0	14.0
4	陈凤莲	广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室	18	99	6.0	9.0
5	刘梅	广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室	3	47	3.0	3.0