雌激素受体α基因shRNAi慢病毒载体的构建与滴度测定

• 作者: 党秋红 曾宪旭 楚天骄 班振英 雷冬梅
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: RNA干扰 乳腺肿瘤 雌激素受体α 遗传载体 质粒 癌 绿色荧光蛋白质类
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1107-1109
• 页数: 3页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2012.11.007

摘要

目的:构建雌激素受体(ER)α基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,检测病毒感染细胞的滴度.方法:针对已经筛选确定的ERα基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoR Ⅰ酶切后的pGCsil-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生 shERα-LV慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用shERα-LV载体、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0质粒共转染包装293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果:PCR和测序证实,成功构建ERα shRNA的慢病毒载体shERα-LV.包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为2×108 TU/mL.结论:成功构建人ERα基因RNAi慢病毒载体,为ERα在乳腺癌发生发展中的研究提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	楚天骄	郑州大学第三附属医院病理科	34	118	6.0	8.0
2	雷冬梅	郑州大学第三附属医院病理科	52	178	6.0	8.0
3	党秋红	郑州大学第三附属医院病理科	47	171	7.0	10.0
4	曾宪旭	郑州大学第三附属医院病理科	37	100	5.0	6.0
5	班振英	郑州大学第三附属医院病理科	36	135	5.0	9.0