双重荧光定量RT-PCR快速检测流感病毒H1、H3亚型的研究

• 作者: 刘涛 房师松 李健雄 王婷 肖丽霞
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 流感病毒 H1亚型 H3亚型 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 30-33
• 分类号: R511.7
• 语种: 中文

摘要

目的 利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测流感病毒H1、H3亚型的方法.方法 根据H1、H3亚型流感病毒HA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立优化反应体系后,将荧光定量RT-PCR的产物采用10倍稀释法,即107～100 copies/μl,再次用荧光定量PCR方法检验建立体系的灵敏度和重复性,并建立相对定量标准曲线；利用多种流感病毒和具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性.结果 H1和H3亚型流感病毒的检测灵敏度为102 copies/μl,扩增效率分别为101.35％和113.28％,标准曲线相关系数大于99％,重复性良好,特异度实验未发现有非特异性扩增.结论 本研究建立的双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地检测H1、H3亚型流感病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	房师松		91	425	12.0	16.0
2	刘涛		29	155	7.0	11.0
3	王婷	中山大学公共卫生学院	16	62	4.0	7.0
4	肖丽霞		9	25	3.0	4.0
5	李健雄	中山大学公共卫生学院	4	24	3.0	4.0