人羊膜上皮细胞体外培养重建角膜上皮的实验研究

• 作者: 刘小勇 吴静 周清 姚敏 徐锦堂 王彦平 贺春香 金玲 陈剑
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 羊膜 角膜 上皮细胞 组织工程
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 689-693
• 分类号: R363
• 字数: 4022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.04.019

摘要

目的:探讨人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,HAECs)诱导分化为角膜上皮细胞的可塑性及其重建角膜上皮的可行性.方法:取足月产人羊膜,通过胶原酶、胰蛋白酶和EDTA消化获得HAECs,将细胞在体外培养扩增、传代,将2～3代HAECs接种于去上皮的兔角膜基质上培养,待HAECs融合形成单层后,置于插入式培养皿中进行气液界面培养14 d.对角膜基质上培养的HAECs用光镜、扫描电镜和透射电镜进行形态学及超微结构观察,以及细胞角蛋白(CK)3/12的免疫组织化学检测.结果:HAECs可在角膜基质上生长,培养1～2 d可形成单层,气液界面培养14 d可形成4～5层细胞的复层上皮,扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛,透射电镜下可见上皮细胞之间有桥粒连接,免疫组化检测复层细胞表达CK3/12,所形成的复层结构与正常角膜上皮相似.结论:HAECs有可能作为种子细胞用于组织工程角膜上皮重建.