丙型肝炎病毒核心蛋白对HepG2细胞生长周期的影响

• 作者: 姜傥 罗琼 肖定璋 陈景
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 丙型肝炎病毒核心蛋白 HepG2细胞 细胞周期蛋白D1 pRb/p130
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 631-637
• 分类号: Q78
• 字数: 6574字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.04.010

摘要

目的:构建丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-core-1b)真核重组质粒,获得稳定表达HCV-core-1b的HepG2细胞株,观察HCV-core-1b对HepG2细胞株生长周期及cyclin D1 和pRb/p130表达的影响,探讨丙型肝炎病毒慢性感染的可能机制.方法:将HCV-core-1b亚克隆入pBabe-Flag-puro载体,获得重组质粒pBabe-Flag-HCV-core-1b;将重组质粒转染病毒包装细胞Pheonix 293T,筛选获得分泌HCV-core-1b的病毒包装细胞株.利用包装细胞产生的病毒上清感染靶细胞,筛选后获得稳定表达HCV-core-1b的HepG2细胞株,流式细胞仪检测靶细胞生长周期的变化,Western blotting检测cyclin D1 和pRb/p130蛋白的表达.结果:基因测序确认HCV-core-1b亚型基因编码区完整无移位,与标签蛋白Flag形成融合蛋白.HepG2-HCV-core细胞株成功表达Flag-HCV-core-1b蛋白,并导致细胞cyclin D1 和 pRb/p130的水平下调,显著改变了HepG2细胞生长周期,使细胞阻滞在G0/G1期.结论:成功构建了pBabe-Flag-HCV-core-1b真核表达质粒,获得稳定表达Flag-HCV-core-1b融合蛋白的HepG2细胞.由于HCV-core-1b蛋白的表达,下调了HepG2细胞 cyclin D1和pRb/p130的表达,显著抑制HepG2细胞生长周期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖定璋	广东省人民医院医学研究中心	8	24	3.0	4.0
2	姜傥	中山大学附属第一医院检验科	64	276	8.0	13.0
3	罗琼	广东省人民医院血液科	7	16	3.0	3.0
4	陈景	广东省人民医院医学研究中心	3	7	2.0	2.0