组蛋白变异体macroH2A1真核表达载体构建及其细胞内定位的研究

• 作者: 卢康荣 姜勇 张菁 王娟 罗海华
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 组蛋白变异体macroH2A1 血凝素类 细胞内定位 载体构建
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 506-509,封2
• 分类号: Q512.7
• 语种: 中文

摘要

目的 构建带有血凝素(HA)标签的小鼠组蛋白变异体macroH2A1 (mH2A1)的真核表达载体,并观察其在人胚肾293T细胞中的表达定位情况.方法 提取内毒素休克的BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应获得内毒素休克小鼠肝脏组织的cDNA,以cDNA为模板使用PCR方法扩增得到mH2A1编码序列,并将其酶切后连接至带有HA标记的载体pcDNA3-HA上;对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定.随后将重组质粒瞬时转染293T细胞,利用荧光显微镜观察.结果 PCR、双酶切和测序鉴定表明pcDNA3-mH2A1-HA真核表达质粒构建正确；经转染实验发现,该质粒能够在293T细胞中表达,表达产物主要定位在细胞核中.结论 mH2A1真核表达载体pcDNA3-mH2A1-HA的成功构建及明确其在哺乳动物细胞中的具体核定位,为进一步研究mH2A1作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王娟	南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室	28	123	6.0	10.0
2	姜勇	南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室	72	377	8.0	17.0
3	卢康荣	南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室	14	40	4.0	5.0
4	张菁	南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	罗海华	南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室	8	12	2.0	3.0