Kisspeptin-10对无血清培养鸡F1级卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响及机制研究

• 作者: 倪迎冬 吴晶 肖蕴祺 赵茹茜 黄炎冰
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: kisspeptin-10 钙离子 孕酮 颗粒细胞 伊莎褐蛋鸡
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 391-398
• 分类号: S823
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.02.023

摘要

[目的]研究kisspeptin-10对无血清培养的鸡卵泡颗粒细胞孕酮分泌的作用及可能机制.[方法]选取200日龄处于产蛋高峰期的伊莎蛋鸡,于排卵前剖腹收集F1卵泡,分离纯化颗粒细胞,于含胎牛血清培养基中培养24 h,换成无血清培养基稳定培养24 h后,用不同浓度的Kp-10、U73122、EGTA等单独或共同处理细胞,收集细胞上清,放射免疫学方法检测培养基中孕酮含量.[结果](1)通过免疫细胞化学方法,显示颗粒细胞上有Kp-10免疫活性样物质的阳性表达；(2)Kp-10处理可显著增加无血清培养的颗粒细胞的活力,100 nmol·L-1时可显著促进孕酮的分泌(P＜0.05)；(3)与对照组相比,2μmol·L-1 U73122(磷脂酶C抑制剂)对孕酮的分泌无显著影响(P＞0.05),而0.5、2μmol·L-1 U73122能显著降低Kp-10对孕酮分泌的促进作用(P＜0.05)； (4)钙离子阻断剂Verapamil( 1-100 μmol·L-1)呈剂量依赖性降低孕酮的分泌,于100μmol·L-1时达显著降低水平(P＜0.05)；与1 μ mol·L-1Verapamil单独处理组相比,100 nmol·L-1 Kp-10与1μmol·L-1 Verapamil同时处理可显著增加孕酮的分泌,而与10、100 μ mol·L-1Verapamil共同处理不能逆转其对孕酮分泌的抑制作用(P＞0.05),且胞内钙离子含量与上清液中孕酮分泌水平相一致； (5)与100 nmol·L-1 Kp-10处理组相比,1和5mmol·L-1 EGTA共同处理时孕酮分泌显著降低,当再加入1.5 mmol·L-1 Ca2+时孕酮分泌量显著增加.[结论]Kp-10促进体外培养的鸡卵泡颗粒细胞孕酮的分泌,其机制可能与胞内Ca2+信号通路有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵茹茜	南京农业大学动物医学院	145	1909	24.0	36.0
2	倪迎冬	南京农业大学动物医学院	37	276	9.0	15.0
3	黄炎冰	南京农业大学动物医学院	3	14	2.0	3.0
4	肖蕴祺	南京农业大学动物医学院	1	9	1.0	1.0
5	吴晶	南京农业大学动物医学院	3	13	2.0	3.0