秀丽隐杆线虫去饱合酶FAT1基因密码子优化及真核表达载体构建

• 作者: 倪凤娥 杨鹏华 陆小冬
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: FAT1基因 密码子优化 真核表达
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 54-58
• 分类号: S813.3
• 字数: 2852字
• 语种: 中文

摘要

ω-3长链多不饱和脂肪酸对人体的营养和健康具有重要意义,一旦缺乏将会引起人类各种疾病.去饱和酶FAT1基因是在线虫中合成ω-3长链多不饱和脂肪酸最关键的基因.为了对FAT1基因的密码子进行优化,并构建一个真核表达载体,利用JCat软件对FAT1基因进行了密码子优化,得到一个优化后的基因FAT1m.设计突变引物,利用重叠PCR法拼接全长FAT1m基因,并连接到pBudCE载体中.结果表明:FAT1m基因的16个密码子被改造,包括Val2个,Ser2个,Gln8个,Leu4个,但是并没有改变氨基酸序列.并且把FAT1m基因连接到pBudCE载体,成功构建了真核表达载体pBud-FAT1m.