HeLa细胞cDNA文库及酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CPn0308的构建

• 作者: 刘雪晴 王春苗 田颖新 贾天军 贾晓晖
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: HeLa细胞 cDNA文库 pGBKT7-CPn0308 酵母双杂交 自激活
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 148-152
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 4361字
• 语种: 中文

摘要

旨在利用酵母双杂交系统构建HeLa细胞的cDNA文库,并构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CPn0308.从HeLa细胞中提取总RNA,应用SMARTTM技术,构建以pGADT7-Rec为载体的HeLa细胞酵母GAL4AD融合cDNA文库.应用PCR技术扩增目的片段CPn0308,并成功克隆该基因到诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒转化酵母菌株AH109后,检测诱饵载体有无自激活和细胞毒性作用.结果显示,文库展现良好的多态性,重组诱饵载体pGBKT7-CPn0308不具有毒性且未自主激活报告基因,说明该文库和诱饵质粒可用于酵母双杂交系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾天军	河北北方学院病原生物学实验室	100	295	7.0	14.0
2	刘雪晴	河北北方学院病原生物学实验室	16	25	3.0	4.0
3	贾晓晖	河北北方学院病原生物学实验室	31	57	5.0	6.0
4	王春苗	河北北方学院病原生物学实验室	12	8	2.0	2.0
5	田颖新	河北北方学院病原生物学实验室	5	3	1.0	1.0