人pcDNA3.1(+)-Cav-1真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 任彩萍 文秋元 朱德茂 王磊 袁松英
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽癌 caveolin-1(Cav-1) 转移 真核表达载体 转染
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-10
• 页数: 4页
• 分类号: R-331
• 字数: 2688字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pcDNA3.1 (+)-Cav-1真核表达载体,建立稳定转染pcCav-1的6-10B细胞系(6-10B-Cav-1).方法 提取5-8F细胞总RNA,利用RT-PCR获取caveolin-1(Cav-1)开放读码框(Open reading frame,ORF)序列构建Cav- 1/TA亚克隆载体,再将双酶切后的目的片段连入pcDNA3.1(+)真核表达载体并转染6-10B细胞.结果 RT-PCR扩增Cav-1基因ORF序列在783 bp附近见目的条带；质粒酶切鉴定及菌落PCR鉴定分别在783 bp及346 bp附近见目的条带；转染6-10B细胞后,转染组与对照组相比,Cav-1在mRNA水平表达差异具有统计学意义(P =0.027),在蛋白质水平前者比后者高出2倍以上.结论 人Cav-1重组真核表达载体pcDNA3.1( +)-Cav-1构建成功并获得稳定表达Cav -1的6-10B细胞,为进一步检测C av -1在鼻咽癌转移过程的作用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任彩萍	中南大学肿瘤研究所	21	135	6.0	11.0
2	王磊	中南大学肿瘤研究所	58	477	11.0	20.0
3	文秋元	湖南省脑科医院病理科	2	4	1.0	2.0
4	朱德茂	湖南省脑科医院病理科	4	7	2.0	2.0
5	袁松英	湖南省脑科医院病理科	2	4	1.0	2.0