肠出血型大肠埃希菌O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体的制备和初步纯化

• 作者: 万成松 周莹 张其威 王春晖 赵素慧 韦耀
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠出血型大肠埃希菌 O157:H7 EspF蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 267-270
• 分类号: R378.2
• 语种: 中文

摘要

目的 制备肠出血型大肠埃希菌(EHEC) O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体并初步纯化.方法 生物信息学方法分析EHEC O157:H7 EspF蛋白的柔韧性、亲水性、表面可能性及抗原表位,选取1条由15个氨基酸残基组成的多肽为半抗原,在其C端偶联钥孔血蓝蛋白(KLH),免疫新西兰大白兔制备抗血清.ELISA测定抗血清效价,免疫印迹法鉴定其特异性,辛酸-硫酸铵法初步纯化抗血清,SDS-PAGE检测抗体纯度.结果 选择EspF蛋白抗原指数最高的肽段72-TPSRPAPPPPTSGQA- 86 (0.506)为半抗原,合成抗原多肽经高效液相色谱鉴定,纯度为95.78％,经质谱分析其分子量为1 563.76 Mr,与目的多肽分子量一致；加强免疫3次后,EHEC O157:H7 EspF蛋白的抗血清效价达1∶2048 000;该血清对EHEC O157:H7野生株和espF突变株(△espF)的EspF蛋白均有特异性,并经辛酸-硫酸铵法获得一定纯度的抗体.结论 成功地制备了效价高、特异性强的EHEC O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万成松	南方医科大学公共卫生与热带医学学院中心实验室	54	328	12.0	16.0
2	张其威	南方医科大学公共卫生与热带医学学院中心实验室	6	9	2.0	3.0
3	赵素慧	南方医科大学公共卫生与热带医学学院中心实验室	6	12	2.0	3.0
4	周莹	南方医科大学公共卫生与热带医学学院中心实验室	6	14	3.0	3.0
5	韦耀	南方医科大学公共卫生与热带医学学院中心实验室	4	6	2.0	2.0
6	王春晖	南方医科大学公共卫生与热带医学学院中心实验室	4	8	2.0	2.0