一种新型转铁蛋白受体结合肽的筛选与鉴定

• 作者: 张齐好 徐单单 苏志坚 许华 郑青 黄亚东
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 转铁蛋白受体 多肽 噬菌体展示肽库 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-18
• 分类号: R730.5
• 字数: 2784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2012.11.005

摘要

目的 以转铁蛋白受体(TfR)为靶标,从噬菌体随机七肽库淘选TfR结合肽并进行鉴定.方法 经过三轮筛选,从平板上挑取分隔良好的特异性TfR结合肽单克隆,采用ELISA初步鉴定后行扩增测序及多肽合成,采用流式细胞仪检测人肝癌HepG2细胞表面TfR表达、采用免疫荧光实验及激光共聚焦实验行噬菌体与细胞共定位 鉴定、采用短肽-噬菌体竞争抑制实验检测短肽对噬菌体的竞争抑制率,以正常肝脏L-O2细胞为对照.结果 特异性TfR结合肽克隆最终富集度达80倍；初步检测到20个阳性克隆,其中9号克隆对TfR亲和力最高,测序表明其展示短肽序列为AHLHNRS,以碱性氨基酸为主,经HPLC检测纯度为99.91％；HepG2细胞表面TfR表达显著高于L-O2细胞；免疫荧光实验及激光共聚焦实验均显示9号噬菌体(P9)出现在HepG2细胞表面,而对照L-O2细胞无此现象；短肽与噬菌体P9对TfR的结合存在竞争关系,并且呈浓度依赖性,而野生型噬菌体M13与L-O2不存在此现象.结论 本研究获得一条与TfR具有特异性结合能力的TfR结合肽；此为进一步构建肿瘤和脑源性疾病靶向治疗药物奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑青	暨南大学药学院	67	505	12.0	19.0
2	许华	暨南大学药学院	77	568	13.0	20.0
3	黄亚东	暨南大学医药生物技术研究开发中心	85	740	15.0	23.0
4	张齐好	暨南大学医药生物技术研究开发中心	13	59	4.0	7.0
5	苏志坚	暨南大学医药生物技术研究开发中心	51	273	8.0	14.0
6	徐单单	暨南大学药学院	4	1	1.0	1.0