锁核酸结合分子信标技术检测乙型肝炎病毒DNA G1896A点突变研究

• 作者: 叶贤林 宋庆涛 张红 曾劲峰 熊文 王大明 蔡剑英 郑欣
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 变异 分子信标 锁核酸 实时荧光PCR
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 162-164,183
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文

摘要

目的 研究和评估乙型肝炎病毒(HBV)DNA G1896A点突变的实时荧光PCR检测方法.方法 收集经测序验证HBV DNA G1896A未突变的野生型样本150例和已发生突变的突变型样本58例,在突变区域设计分子信标探针,点突变处进行锁核酸处理,利用荧光PCR方法检测HBV前C区G1896A点突变；再从临床标本中随机抽取18例、8例和19例荧光PCR结果分别显示为G1896A突变的标本、杂合的标本以及野生型的标本的PCR产物进行序列测定.结果 突变型质粒和野生型质粒的检测灵敏度均可以达到100 copies/ml；突变型探针检测高浓度的野生型质粒时无检测信号,野生型探针检测高浓度突变型质粒时无检测信号；突变型模板在总杂合模板中的比例达到5％时则都可以将突变型检测出来；序列测定的8例G1896A突变标本、6例杂合标本和19例野生型标本的PCR产物结果和荧光PCR检测结果完全吻合.结论 实时荧光PCR检测方法可以快速、简便、准确地检测HBV DNA G1896A点突变,是检测点突变的重要方法,具有重要的临床应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊文	深圳市血液中心检验科	56	477	11.0	20.0
2	曾劲峰	深圳市血液中心检验科	70	535	12.0	18.0
3	张红	深圳市血液中心检验科	19	145	7.0	11.0
4	叶贤林	深圳市血液中心检验科	58	529	13.0	19.0
5	郑欣		1	0	0.0	0.0
6	宋庆涛		1	0	0.0	0.0
7	蔡剑英		1	0	0.0	0.0
8	王大明		1	0	0.0	0.0