重组大鼠GATA4-pEGFP基因在骨髓间充质干细胞的表达及意义

• 作者: 张以忠 杨淑艳 赵东海 赵丽薇 钟秀宏
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 GATA4基因 增强型绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-24
• 分类号: R542.22
• 字数: 2072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2012.11.007

摘要

目的 体外获得表达重组大鼠GATA4-pEGFP基因的骨髓间充质干细胞(MSCs),为进一步研究后者在心肌梗死治疗中的作用奠定基础.方法 提取胎鼠心肌细胞总RNA,RT-PCR法扩增获得GATA4基因,将目的基因克隆到pEGFP-N3载体并获得重组后GATA4-pEGFP质粒,采用密度梯度离心法联合贴壁法分离骨髓单个核细胞并获得MSCs.将重组质粒GATA4-pEGFP以Lipo2000转染到大鼠MSCs,G418筛选2周,Western blot和荧光检测重组质粒在MSCs中的表达情况.结果 成功构建重组大鼠GATA4-pEGFP真核表达载体并转染入MSCs中,Western blot和荧光检测证实GATA4-pEGFP基因在MSCs中呈阳性表达.结论 成功建立表达大鼠GATA4-pEGFP基因的MSCs,此为利用组织工程学方法治疗心肌梗死的研究奠定了基础.