SIRT1基因shRNA慢病毒载体构建及干扰效应检测

• 作者: 刘强 杜利清 王彦 赵辉 邓昭玲 陈乃耀
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 SIRT1 转染 炎症 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2012,（28）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 5255-5259
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 4755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.28.026

摘要

背景:SIRT1基因在细胞能量代谢、凋亡及衰老过程中发挥极重要的作用,另有研究发现SIRT1可能在炎症反应方面起着调控作用.目的:构建SIRT1特异性的shRNA慢病毒载体,并初步检测其对THP-1细胞SIRT1基因的抑制效应.方法:设计SIRT1靶点特异性的寡核苷酸序列,连接到经Age Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切线性化的pGCSIL-GFP载体,包装293T细胞产生慢病毒,再转染THP-1细胞,通过实时荧光定量PCR实验及Western Blot检测对SIRT1靶基因的抑制情况.结果与结论:阳性克隆PCR及测序证实SIRT1基因shRNA慢病毒载体构建成功,实时荧光定量PCR及Western Blot检测该载体在mRNA和蛋白水平能抑制THP-1细胞的SIRT1表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘强	中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室	83	201	7.0	10.0
2	赵辉	天津商业大学生物技术与食品科学学院天津市食品生物技术重点实验室	18	67	6.0	7.0
3	王彦	中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室	21	85	5.0	8.0
4	杜利清	中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室	21	45	4.0	5.0
5	邓昭玲	河北联合大学附属医院血液科	1	2	1.0	1.0