木薯脆性胚性愈伤组织原生质体培养与植株再生

• 作者: 张鹏 文峰 聂扬眉 肖诗鑫 郭文武 马秋香
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 木薯 脆性胚性愈伤组织(FEC) 原生质体 植株再生
• 年，卷（期）: 2012,（19）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 4050-4056
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.19.017

摘要

[目的]建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础.[方法]酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90％.用TM2C培养基以液体浅层法分别在5 ×105个/mL和2× 105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10d更换1次,此后每10d用0.25 mol·L-1 TM2G新鲜培养基更换.原生质体培养45d后即可挑出1-2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根.[结果]在5× 105个/mL的原生质体培养密度下,长出的都是致密型愈伤组织(能分化胚状体),而在2× 105个/mL的密度下培养长出的有致密型愈伤组织,也有空泡型愈伤组织(不能分化胚状体).本试验共挑出1 479个致密细胞团,分化获得757个子叶胚,已再生完整植株186棵.[结论]本研究分离的原生质体产量和活性有较大提高,对前人所指出的瓶颈问题有所改进,原生质体再生植株效率有较大提高.