细菌直接PCR和双引物策略鉴定16S rRNA基因技术的建立

• 作者: 张志敏 张艳芳 易娟 李培茂 汤海燕 王佃鹏 童向东 罗斌 董瑞玲 邓丽丹
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细菌 直接PCR 16S rRNA
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 181-183
• 分类号: R446.61
• 语种: 中文

摘要

目的 探索一种基于16S rRNA基因的快速鉴定细菌方法,为临床诊断治疗及耐药菌的分子遗传分析提供科学依据.方法 对卫生部室间质评菌株和临床病人标本分离培养纯菌落,用双蒸水稀释菌落,然后直接以菌液为模板优化反应体系PCR扩增16S rRNA基因片段,再测序扩增片段.将测序结果在细菌Ribosomal数据库中进行同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌.结果 本实验鉴定的卫生部质评菌株结果与卫生部报告结果一致.本实验能够一次性鉴定出临床病人标本分离的菌株.结论 本研究优化了一种免纯化细菌核酸直接PCR鉴定细菌16S rRNA基因的方法.本研究建立的基于病原细菌16S rRNA基因鉴定方法可用于细菌的快速诊断.