变形链球菌pacA和gtfB-cat与ctxB嵌合表达质粒的构建及表达

• 作者: 刘建国 吴家媛 张剑 杨德琴 赵秀 顾瑜
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 链球菌,酿脓 糖基转移酶类 霍乱毒素 膜蛋白质类 质粒 嵌合状态 原核细胞
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 533-536
• 分类号: R781.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2012.06.002

摘要

目的:构建含变形链球菌表面蛋白A区编码基因(pacA)、葡糖基转移酶催化区编码基因(gtfB-cat)及霍乱毒素B亚单位编码基因(ctxB)的嵌合表达质粒并表达目的蛋白.方法:将目的基因pacA、gtfB-cat、ctxB克隆至原核克隆载体pET32-a(+)构建嵌合质粒pET-pacA-cat-ctxB,将其转入表达宿主菌E.coliBL21(DE3),并测量其表达情况.结果:构建的重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,证实目的基因均正确插入到载体pET-32a(+)中,插入的相位正确,未改变目的基因的阅读框架,经诱导后表达目的蛋白,分子质量大小与预期一致.结论:成功构建了嵌合质粒pET-pa-cA-cat-ctxB,且它们均在原核细胞内获得正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨德琴		25	64	5.0	7.0
2	赵秀		6	11	2.0	2.0