ts-SV40LT抗原转基因干细胞增殖活性的温度调控机制分析

• 作者: 刘振林 刘晓智 刘洪良 姜忠敏 李罡 盛凤
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 间质干细胞 脐带 细胞增殖 转基因 增殖细胞核抗原 低温 周期素依赖激酶抑制剂p16 周期素依赖激酶抑制剂p21 细胞周期蛋白质依赖激酶类 磷酸丙酮酸水合酶 神经胶质原纤维酸性蛋白质
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 247-250
• 分类号: R651.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2012.03.017

摘要

目的:研究温度敏感性猿猴病毒40大T抗原(ts-SV40LT)转基因干细胞增殖活性的温度调控机制.方法:用含ts-SV40LT抗原的表达质粒转染脐带间充质干细胞(UCMSCs),将其分别置于33℃和37℃培养,细胞免疫荧光方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)活性,PCR-ELISA端粒酶检测法检测端粒酶活性及细胞周期,Western Blot法检测周期素(Cyclin)D1、CyclinE、周期素依赖性蛋白激酶(CDK)2、CDK4、CDK6、P16和P21的蛋白表达情况,免疫荧光方法检测巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果:细胞在33℃时培养24、48、72 h的PCNA阳性表达百分率均高于37℃时,差异有统计学意义(P＜0.01).转染tsSV40LT抗原基因后,细胞在33℃培养箱时的端粒酶活性和Plx值高于37℃时,差异有统计学意义(P＜0.01).33℃时的Cyclin D1、CyclinE、CDK2、CDK4、CDK6及Nestin表达量高于37℃时,P16、P21、NSE和GFAP的表达量低于37℃时,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:通过tsSV40LT抗原基因的有效转染可实现干细胞在不同温度环境下的增殖调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜忠敏	天津市第五中心医院病理科	51	155	6.0	9.0
2	刘晓智	天津市第五中心医院神经外科	50	173	6.0	11.0
3	刘振林	天津市第五中心医院神经外科	38	247	11.0	13.0
4	李罡	天津市第五中心医院神经外科	22	127	7.0	10.0
5	盛凤	天津市第五中心医院中医内科	11	21	3.0	3.0
6	刘洪良	天津市第五中心医院神经外科	8	38	3.0	6.0