一种简易的人原代肝细胞分离培养方法

• 作者: 刘广波 吴青松 李治国 高毅
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 原代肝细胞 分离 培养 Ⅱ型胶原酶 灌注法
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 器官移植基础实验
• 页码范围: 3301-3304
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 5165字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.18.016

摘要

背景:采用原位两步灌流法分离肝细胞数量多,活性高,但灌流装置价格昂贵,操作环节多,技术要求高,所需时间长,易污染,限制了在一般实验室及人原代肝细胞在医学中的应用.目的:建立人原代肝细胞体外分离培养方法.方法:采用多点穿刺灌注方法将预温38 ℃的前灌流液及Ⅱ型胶原酶溶液灌依次灌入人肝脏组织中,经消化及离心后获得人原代肝细胞;倒置显微镜和电镜观察细胞形态特征,并鉴定.结果与结论:经多点穿刺灌注法消化分离后可获得约5×105个肝细胞,分离获得的肝细胞活率达90%;细胞培养24 h后呈铺路石样生长;电镜示肝细胞呈典型形态特征:细胞核大,胞质少;培养的肝细胞 PAS糖原染色阳性,白蛋白表达阳性.说明多点穿刺灌注法分离人原代肝细胞简单易行,肝细胞产量高、活力好、纯度高,分离培养的肝细胞具有特异性生物学功能表达,适宜在一般条件实验室推广应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高毅	南方医科大学珠江医院肝胆外科	139	641	14.0	18.0
5	吴青松	南方医科大学珠江医院肝胆外科	1	3	1.0	1.0
6	李治国	南方医科大学珠江医院肝胆外科	5	23	3.0	4.0
7	刘广波	南方医科大学珠江医院肝胆外科	1	3	1.0	1.0