去细胞化全肝生物支架循环灌注培养条件下体外细胞再植

• 作者: 李志国 汪艳 潘明新 程远 胡鹏蕴
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 去细胞化 生物支架 循环灌注培养 细胞再植 肝脏
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 肝移植
• 页码范围: 3231-3235
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 4354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.18.001

摘要

背景:通过去细胞化技术制备全肝生物支架成为缓解供体短缺的新技术,优化肝脏组织的去细胞化流程成为新的课题.目的:通过去细胞化技术建立完整保留肝脏三维结构和脉管系统的全肝生物支架,利用自主设计的循环灌注培养装置实现生物支架体外细胞再植.方法:通过门静脉路径循环灌注去垢剂Triton X-100,十二烷基硫酸钠,并用磷酸盐缓冲液洗脱残留去垢剂.通过动态循环灌注培养装置进行支架与HepG2细胞的共培养,观察植入细胞在全肝生物支架内的功能表达.结果与结论:经去垢剂灌注后,支架呈现保持肝脏三维结构的透明结构,苏木精-伊红染色以及扫描电镜结果显示细胞成分被完全移除,Masson's Trichrome染色可见大量胶原纤维,免疫组化结果证实纤维连接蛋白和层粘连蛋白保存完整.循环灌注培养下细胞白蛋白表达量及尿素合成量较平板培养明显提高.说明去细胞化肝脏生物支架可作为体外肝脏组织重建的基础材料,动态循环灌注方法可实现支架中细胞再植.