利用经修饰的survivin短肽体外诱导对胃癌细胞系具有限制性杀伤作用的特异性细胞毒性T细胞

• 作者: 丁刚 孙婷 魏立梅
• 来源期刊: 科学技术与工程
• 学科: 医学
• 关键词: survivin 经修饰肽段 HLA-A2 外周血单核细胞 特异性细胞毒性T细胞 胃癌细胞系
• 年，卷（期）: 2012,（35）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 9461-9465
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3500字
• 语种: 中文

摘要

采用一种简单有效的方法体外诱导经修饰的survivin短肽特异性细胞毒性T细胞,并观察其对胃癌细胞的杀伤作用.选取对HLA-A2分子亲和力更高的survivin短肽(96-104,LLLGEFLKL,HLA-A2限制性)以更有效地诱导特异性T细胞.选取正常志愿者外周血单核细胞,筛选其中HLA-A2+者,利用HLA-A2/survivin短肽有效诱导特异性细胞毒性T细胞.Pentamer实验检测特异性细胞毒性T细胞比率.Elispot实验检测细胞毒性T细胞IFN-γ分泌能力.选取胃癌细胞系MKN28、SGC7901及KATO Ⅲ,检测其HLA-A2和survivin表达情况.检测特异性细胞毒性T细胞对三种细胞系的杀伤效果.Pentamer实验结果显示,HLA-A2/survivin短肽刺激之前短肽/HLA Pentamer和CD8双阳性细胞仅为0.06％,接受刺激后双阳性细胞增加到27.5％.Elispot实验结果显示HLA-A2/survivin短肽刺激后IFN-γ分泌细胞比率明显强于阴性对照组.PCR结果显示,KATO Ⅲ为HLA-A2+,MKN28和SGC7901为HLA-A2-.Western Blotting结果显示KATO Ⅲ和SGC7901为survivin阳性,MKN28为survivin阴性.特异性细胞毒性T细胞杀伤结果显示,细胞能有效杀伤KATO Ⅲ细胞,但对其他两种细胞杀伤效果不明显.p ＜0.01.经修饰的survivin短肽能够有效诱导特异性细胞毒性T细胞,并对胃癌细胞系有HLA-A2/survivin限制性杀伤.