利用RNAi技术沉默麦长管蚜与桃蚜细胞色素P450

• 作者: 夏兰琴 张小红 张珉 王晖
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 麦长管蚜 桃蚜 细胞色素P450 RNA干扰 双链RNA
• 年，卷（期）: 2012,（17）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 3463-3472
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.17.002

摘要

[目的]通过体外饲喂双链RNA( dsRNA),利用RNAi技术沉默麦长管蚜和桃蚜体内细胞色素P450.[方法]采用PCR克隆获得麦长管蚜和桃蚜体内细胞色素P450片段;利用双链RNA合成试剂盒合成麦长管蚜和桃蚜细胞色素P450保守序列的dsRNA;在蚜虫人工饲料中,分别加入终浓度为0、3、5和7.5 ng·μL-1的dsRNA,每个试验组设置3个重复,分别于饲喂后2天、4天、6天、8天统计蚜虫的存活数；利用实时荧光定量PCR技术分析饲喂后目标基因的表达抑制情况.[结果]从麦长管蚜与桃蚜的cDNA中分别克隆细胞色素P450,所克隆片段同源性为90.1％,发现随着dsRNA浓度的增大,麦长管蚜和桃蚜的死亡率随着时间的推移不断升高,最高死亡率可分别达75.56％和64.44％.提取饲喂dsRNA浓度为7.5 ng·μL-1的不同时间段的蚜虫总RNA,实时荧光定量PCR结果表明,目的基因被沉默.[结论]利用麦长管蚜和桃蚜细胞色素P450保守序列的dsRNA,体外饲喂后,通过RNA干扰(RNAi),能够显著降低蚜虫体内细胞色素P450的表达水平,直至导致目的基因沉默和蚜虫死亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张小红	西北农林科技大学生命科学学院	29	342	11.0	18.0
2	王晖	西北农林科技大学生命科学学院	4	25	2.0	4.0
4	夏兰琴	中国农业科学院作物科学研究所	6	117	6.0	6.0
7	张珉	中国农业科学院作物科学研究所	1	17	1.0	1.0