小干扰RNA特异靶向沉默RRM2基因对人肝癌细胞HepG2的生物学影响

• 作者: 瞿丽 谢达飞 陈辉 黄永刚
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: RNA干扰 RRM2基因 癌,肝细胞
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 肝脏外科
• 页码范围: 1917-1920
• 页数: 4页
• 字数: 2555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2012.10.014

摘要

目的 观察RNA干扰沉默RRM2基因表达对人肝癌细胞HepG2细胞生物学影响,并探讨其分子机制.方法 利用小RNA干扰(siRNA)技术沉默HepG2细胞中RRM2基因的表达,用采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot技术检测RRM2 mRNA及蛋白的表达；用细胞计数试剂盒(CCK-8)方法检测siRNA-RRM2对HepG2细胞增殖的影响；用Transwell细胞迁移系统检测siRNA-RRM2对HepG2细胞迁移能力的影响；采用Western blot技术检测抗凋亡蛋白B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2),促凋亡蛋白bax和细胞色素C(Cyt-C)蛋白水平变化；建立成瘤模型每组10只,观察RRM2基因沉默后对移植瘤生长的影响.结果 siRNA-RRM2有效沉默HepG2细胞中RRM2表达；CCK-8法结果显示与对照组比较下调RRM2基因抑制HepG2增殖[(41.20±2.13)％比(91.35±10.22)％]；Transwell细胞迁移系统检测显示下调RRM2基因后,显著抑制了HepG2的迁移能力(21.20±1.28比132.50±7.88)；Western blot结果显示抗凋亡蛋白bcl-2下调,促凋亡蛋白bax上调,Cyt-C上调；体内实验证实下调RRM2组肿瘤体积明显小于对照组,到第8周时,siRNA-RRM2组肿瘤体积为(171.13 ±28.12) mm3,对照组为(1487.41±168.20) mm3.结论 siRNA-RRM2能显著抑制RRM2基因在人肝癌细胞HepG2中的表达,部分逆转HepG2的恶性生物学行为并明显抑制HepG2在裸鼠体内的成瘤和生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	瞿丽	浙江医院普外科	10	85	4.0	9.0
2	陈辉	浙江医院普外科	13	136	5.0	11.0
3	谢达飞	浙江医院普外科	9	40	4.0	6.0
4	黄永刚	浙江医院普外科	5	20	3.0	4.0