人骨形态发生蛋白2基因重组腺病毒表达载体转染兔骨髓间充质干细胞

• 作者: 何春耒 何澄 刘午阳 叶勇军 吴东宝 姬广林 王茂源 莫建文 高辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒载体 骨形态发生蛋白类 骨髓间充质干细胞 GatewayTM 技术 转染
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1817-1821
• 分类号: R394.2
• 字数: 5069字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.024

摘要

背景:采用GatewayTM 技术构建腺病毒载体,显著弥补了外源性细胞因子局部应用的缺陷.目的:观察人骨形态发生蛋白2 重组腺病毒表达载体(Ad-BMP-2/GFP) 转染兔骨髓间充质干细胞后骨形态发生蛋白2 的表达情况.方法:密度梯度离心联合贴壁培养法,分离、培养、纯化兔骨髓间充质干细胞;GatewayTM 技术构建的Ad-BMP-2/GFP 腺病毒载体转染兔骨髓间充质干细胞.结果与结论:RT-PCR 检测转染诱导后的细胞表达成骨细胞特异性产物骨钙素;转染后兔骨髓间充质干细胞在mRNA 水平和蛋白水平均有人骨形态发生蛋白2 的表达.结果表明构建的Ad-BMP-2/GFP 可高效转染兔骨髓间充质干细胞,骨形态发生蛋白2 在细胞中能高效表达.