亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒核酸检测标准物质的制备研究

• 作者: 乔彩霞 单虎 吴亚琼 吴延功 尹燕博 张利峰 张鹤晓 朱淑芬 王慧珊 高志强
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 口蹄疫病毒 亚洲Ⅰ型 核酸扩增 标准物质
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 8-12
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2012.08.003

摘要

针对目前口蹄疫病毒核酸扩增检测缺乏标准物质的现状,以口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型核酸为模板,分别设计引物扩增具有检测意义的5′端1nt～2208nt的片段(含完整的5′NCR)和3012nt～5155nt片段(含完整1D～2B区域),并克隆于pMD20-T.测序后采用体外转录方法制备2种RNA纯品,进行初步定量稀释后等量混合分装.采用荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验后,委托外部实验室对RNA片段进行拷贝数定值.结果显示,制备的标准品均匀性和稳定性良好.