瘦素诱导乳腺癌细胞中端粒酶反转录酶表达的机制

• 作者: 任贺 李莎莎 王秀超 盛俊 苑占娜 赵天锁 郝继辉
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 瘦素 乳腺肿瘤 MCF7细胞系 端粒酶逆转录酶
• 年，卷（期）: 2012,（34）
• 所属期刊栏目: 乳腺癌诊治
• 页码范围: 2386-2388
• 分类号: R4
• 字数: 2423字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2012.34.004

摘要

目的 探讨在乳腺癌细胞(MCF7)中瘦素诱导端粒酶反转录酶(hTERT)表达的分子机制.方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定瘦素对沉默信号转导和转录激活因子3( STAT3)基因后MCF7细胞hTERT mRNA表达水平的影响.采用Western印迹方法测定MCF7细胞经不同处理后hTERT蛋白的表达变化.采用染色质免疫共沉淀(CHIP)技术观察STAT3与hTERT启动子的结合情况.应用双荧光素酶分析,探讨瘦素及P-STAT3抑制剂(AG490)对hTERT 启动子转录活性的影响.结果 STAT3小干扰片段RNA( siRNA)转染细胞后,瘦素诱导的hTERT mRNA的表达减少.Western印迹结果示hTERT蛋白在瘦素处理组及AG490联合瘦素处理组的蛋白表达分别为3.109±0.051、1.025±0.031,加入P-STAT3抑制剂AG490后,瘦素诱导hTERT蛋白表达明显减少(P＜0.01).ChIP结果显示对照组与瘦素处理组mRNA分别为1、3.311±0.017,瘦素(160 ng/ml)作用MCF7细胞后,增加了STAT3与hTERT启动子之间的结合(P＜0.01).双荧光素酶分析结果示,经瘦素( 160 ng/ml)作用后,hTERT启动子活性的变化倍率为80.98±0.18,对照组为20.76±0.31,加入AG490后,hTERT启动子活性的变化倍率为18.65±0.32,瘦素诱导的hTERT启动子的活性明显下降.结论 在乳腺癌MCF7细胞中,瘦素/STAT3信号通路是上调hTERT表达的可能机制.