p65蛋白的诱导表达及电子显微镜观察其显微结构

• 作者: 朱亚勤 郑倩倩 郭文东
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: p65 透射电镜 包涵体
• 年，卷（期）: 2012,（34）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 6624-6627
• 分类号: Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:构建重组原核表达载体pGEX-5x-1-p65,诱导GST-p65融合蛋白的表达并观察其包涵体的显微结构.方法:应用PCR技术扩增得到p65全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5x-1载体中.经酶切、测序鉴定后,在原核细胞中诱导表达GST-p65融合蛋白并将诱导后的菌体制作透射电镜标本,观察菌体内部显微结构.结果:成功构建表达载体pGEX-5x-1-p65,原核细胞中诱导表达、凝胶电泳后未见可溶性融合蛋白的高效表达.透射电镜观察到在承载有重组载体的菌体内部出现大量高电子密度的包涵体.结论:成功构建了原核表达载体pGEX-5x-1-p65,电子显微镜观察并证实在原核细胞内p65蛋白诱导表达形成包涵体.