正交设计优化大白菜ISSR-PCR反应体系

• 作者: 吴春燕 宋廷宇 张晓明 韩玉珠 高义
• 来源期刊: 北方园艺
• 学科: 农学
• 关键词: 大白菜 ISSR 正交设计 PCR反应体系
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 127-129
• 分类号: S634.103.6
• 字数: 1799字
• 语种: 中文

摘要

以大白菜为试材,采用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取大白菜基因组DNA,采用正交实验设计方法,对dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物、及模板DNA五因素四水平进行优化,筛选并建立了适合大白菜的ISSR-PCR反应体系.结果表明:25 μL的反应体系中含有1.5 mmol/L Mg2+、200 μmol/L dNTP、0.5 UTaq DNA聚合酶、0.7 μmol/L引物、30 ng模板DNA.在此基础上探讨了最佳循环次数,应用该优化反应体系,用3个不同循环数对资源DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示优化的反应体系适宜的循环次数是30.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩玉珠	吉林农业大学园艺学院	63	525	11.0	21.0
2	张晓明	吉林农业大学园艺学院	45	277	8.0	15.0
3	吴春燕	吉林农业大学园艺学院	39	139	6.0	10.0
4	高义	吉林农业大学园艺学院	1	2	1.0	1.0
5	宋廷宇	吉林农业大学园艺学院	32	140	7.0	10.0