长期冻存和新鲜胃癌组织总RNA提取方法的比较

• 作者: 叶文静 夏作理 赵晓民 韩纪举
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 总RNA提取 胃癌 实时反转录-聚合酶链反应 异硫氰酸胍 Trizol 硅胶柱
• 年，卷（期）: 2012,（24）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4486-4490
• 分类号: R318
• 字数: 4697字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.24.024

摘要

背景:目前两种最可靠、应用最广的高通量RNA分离技术是基于异硫氰酸胍-酚︰氯仿的RNA分离技术和基于硅胶柱的RNA分离技术.在临床应用非常有限的组织材料时,有必要对RNA分离技术的可重复性和可靠性分别进行先期评价.目的:系统比较采用硅胶柱法和Trizol法从冻存、新鲜胃癌组织中分离总RNA的效果.方法:硅胶柱法和Trizol法分别提取长期-80 ℃冻存的(2年以上)和新鲜胃癌组织总RNA,紫外分光光度法比较RNA纯度,琼脂糖凝胶电泳分析28 S和18 S吸光度比值,进一步通过实时反转录-聚合酶链反应对扩增距mRNA polyA尾端不同大小片段的Ct值进行比较,间接判断不同大小mRNA的拷贝数及完整性.结果与结论:硅胶柱技术和Trizol方法在总RNA提取的纯度方面都表现很好.然而在RNA完整性方面,基于硅胶柱技术的提取方法要好于Trizol法,因为其核糖体RNA形式完好而且更好地保持了不仅短的及中等大小片段,对于较大的mRNA片段也保持更好.另外,与新鲜组织相比,长时间冻存对胃癌组织总RNA提取的影响很小.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏作理		178	1480	18.0	29.0
2	赵晓民		78	482	13.0	18.0
3	韩纪举		29	246	8.0	15.0
4	叶文静		23	180	9.0	12.0