CDA2基因的原核(pET 22b)表达

• 作者: 黄韵芝
• 来源期刊: 东方教育
• 关键词: 总状毛霉 甲壳素脱乙酰酶 基因重组
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 101-102
• 语种: 中文

摘要

本文所介绍的实验是从处于对数生长期的总状毛霉菌丝体中抽提得到总DNA,用保守的特异性简并引物进行PCR扩增,得到了总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2).然后运用基因重组的方法手段,将 CDA2基因构建进入原核表达质粒 pET22b,经过PCR鉴定、酶切鉴定及其序列测定分析后,证明已成功构建pET22b-CDA2这个重组质粒.对 pET22b-CDA2进行了部分序列测定,结果显示:CDA2的基因(无内含子)均已去除信号肽,并正确的接入了表达区域,且并未产生移码突变.实验中将 pET22b-CDA2这个重组质粒转化进宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)后,采用37℃、终浓度为0.5mmol/L 的 IPTG 诱导重组蛋白表达.结果表明:重组质粒在宿主细胞内都成功地表达产生了蛋白质,所得的重组蛋白的分子量与预计的理论值相符.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄韵芝	中山职业技术学院机械工程系	18	0	0.0	0.0