用于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法

• 作者: 余世明 侯昌禾 张紫机 张阳春 李子卿 盛璞义 翟齐毅
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 石蜡包埋 甲醛固定 免疫荧光 免疫病理 标本 组织
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1188-1192
• 分类号: R318
• 字数: 4155字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.07.012

摘要

背景:甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物.目的:建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法.方法:将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规脱蜡复水,观察不同的柠檬酸缓冲液热修复时间、血清封闭时间、一抗浓度和荧光标记物在免疫荧光法中显色的差异.结果与结论:柠檬酸高温修复15 min 后滴加抗原修复液比单纯高温修复10～20 min,组织结构保存更为完整,且背景染色无显著区别;选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40 min 作为最佳的抗原封闭条件,既可以保证良好的封闭效果,同时又不影响一抗和抗原位点结合;较高一抗浓度(10 mg/L) 能保证明显的荧光信号、低背景和可接受的成本.进行石蜡切片免疫荧光实验,并用普通荧光显微镜观察,应避免采用FITC 等蓝色激发光、呈现绿色荧光信号的标记染料基团.提示柠檬酸高温修复15 min 后滴加抗原修复液,选择体积分数10% 二抗来源正常血清室温封闭40 min,较高一抗浓度,普通荧光显微镜观察可提高免疫荧光法的检测质量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盛璞义	中山大学附属第一医院关节外科	35	202	9.0	13.0
5	余世明	中山大学附属第一医院黄埔关节外科	26	154	8.0	10.0
6	张阳春	中山大学附属第一医院关节外科	12	77	6.0	8.0
7	侯昌禾	中山大学附属第一医院关节外科	8	30	3.0	5.0
8	李子卿	中山大学附属第一医院关节外科	6	23	3.0	4.0
9	张紫机	中山大学附属第一医院关节外科	25	57	5.0	6.0
10	翟齐毅	横沥医院骨科	1	3	1.0	1.0