改良内皮抑素对人脐静脉内皮细胞抑制作用的实验研究

• 作者: 倪双 刘平 田霈 罗鑫 肖楠 齐东华
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 改良内皮抑素(RGDRGD-ES) 内皮抑素(ES) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 角膜新生血管(CNV)
• 年，卷（期）: 2012,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2632-2637,2641
• 分类号: Q813|R772.2
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨改良内皮抑素( RGDRGD-ES)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用,摸索RGDRGD-ES对HUVEC细胞抑制作用的相对最佳作用浓度和时间.方法:通过快速定点诱变PCR方法获得含有RGDRGD膜序的改良人内皮抑素基因,并构建其原核表达载体.表达、纯化改良内皮抑素(RGDRGD-ES),运用MTT法和流式细胞仪检测RGDRGD-ES对人脐静脉内皮细胞的抑制作用.结果:1.诱变了ES基因,获得了改良的RGDRGD-ES基因,并成功构建其原核表达载体.2.获得了RGDRGD-ES蛋白.3.改良的RGDRGD-ES能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长(P＜0.01)；抑制率随着药物浓度(10 μg/ml、20μg/ml、30 μg/ml)的增加和作用时间(24 h、48 h、72 h)的延长而逐渐增加,具有浓度和时间依赖性(P＜0.01)；而30 μg/ml与40 μg/ml、50 μg/ml组间、72 h与96 h组间无明显差异(P＞0.05).4.细胞凋亡率(作用24h)具有药物浓度(10μg/ml、20 μg/ml、30 μg/ml)依赖性(P＜0.01),30 μg/ml与40μg/ml、50 μg/ml组间凋亡率无明显差异(P＞0.05).结论:成功构建了改良RGDRGD-ES基因的原核表达载体,RGDRGD-ES蛋白在30 μg/ml浓度作用72小时条件下能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长,改良内皮抑素( RGDRGD-ES)对HUVEC的抑制作用较ES明显提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘平	哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科	211	863	12.0	19.0
2	肖楠	哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科	4	12	2.0	3.0
3	田霈	哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科	4	21	3.0	4.0
4	罗鑫	哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科	2	5	1.0	2.0
5	齐东华	哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科	2	5	1.0	2.0
6	倪双	哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科	4	5	1.0	2.0