转白血病抑制因子基因人胚肺成纤维细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的影响

• 作者: 夏卫 姜健 田丽娜 缪竞诚 郁心 陈瑶
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 人白血病抑制因子 饲养层 CD34+细胞 体外扩增 造血干/祖细胞
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 56-60
• 分类号: R394.2
• 字数: 5774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.01.012

摘要

背景:单份脐血的造血细胞数量有限,难以满足成人的需要,如何有效地扩增脐血造血干/祖细胞是目前研究的热点.目的:构建人白血病抑制因子基因修饰的人胚肺成纤维细胞,观察转基因细胞对脐血CD34+造血干/祖细胞体外扩增的影响.方法:建立转人白血病抑制因子基因的饲养层细胞,用RT-PCR法和ELISA法鉴定目的基因的表达;采用免疫磁珠法分离脐血CD34+造血干/祖细胞,流式细胞术检测纯度;将CD34+造血干/祖细胞与饲养层细胞共培养,流式细胞术检测各组增殖效果;扩增后的造血干/祖细胞用跨膜迁移实验检测自发迁移率和基质细胞衍生因子1诱导迁移试验以鉴定体外扩增的造血干/祖细胞的归巢能力.结果与结论:成功建立转基因饲养层细胞,RT-PCR法和ELISA法证实有目的基因表达,与人白血病抑制因子转基因饲养层细胞共培养7 d后CD34+造血干/祖细胞可大量扩增,同时表面黏附分子的表达量仍较高.体外迁移实验显示与转基因饲养层细胞共培养的造血细胞的诱导迁移率明显高于对照组,可以较好地保持其归巢能力.因此转人白血病抑制因子基因的饲养层细胞可有效扩增脐血CD34+造血干/祖细胞,延缓其分化,并且体外扩增后仍保持较高的归巢能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室	95	511	13.0	17.0
2	夏卫	无锡市红十字中心血站输血重点实验室	4	4	1.0	2.0
3	郁心	无锡市红十字中心血站输血重点实验室	4	11	2.0	3.0
4	姜健	无锡市红十字中心血站输血重点实验室	2	0	0.0	0.0
5	田丽娜	苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室	3	2	1.0	1.0
6	陈瑶	苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室	24	85	4.0	9.0